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temperature 温度 ( C) （丙） Time 时间 (h) （小时） FM1 Streptococcus thermophilus CR1北京世博翻译公司2 简化嗜热链球菌 Cr 1北京世博翻译公司2 Lactobacillus casei LC01 干酪乳杆菌 lc01 Lactobacillus helveticus PR4 瑞士乳杆菌 pr4 37 3.5 373.5 FM北京世博翻译公司2 S. thermophilus CR1北京世博翻译公司2 fm北京世博翻译公司2 嗜热型 L. casei LC01 Llc01 干酪 Lactobacillus plantarum 1北京世博翻译公司288 植物乳杆菌 1北京世博翻译公司288 37 3.5 373.5 FM3 S. thermophilus CR1北京世博翻译公司2 fm3 嗜热型 L. casei LC01 Llc01 干酪 Lactobacillus acidophilus 北京世博翻译公司2949 嗜酸乳杆菌 北京世博翻译公司2949 37 3.5 373.5 FM4 S. thermophilus CR1北京世博翻译公司2 37 4.5 fm4 嗜热链球菌 4.5 型 37 FM5 L. casei LC01 30 7.5 fm5 干酪 lc01307.5L。 FM6 L. helveticus PR4 37 13 fm6 属瑞士 pr43713 FM7 L. plantarum 1北京世博翻译公司288 30 8 fm7 植物乳杆菌 1北京世博翻译公司288308 FM8 L. acidophilus 北京世博翻译公司2949 37 5 fm8 嗜酸乳杆菌 北京世博翻译公司2949375 北京世博翻译公司2.3. Microbiological analyses and determination of pH 北京世博翻译公司2.3。微生物分析和 PH 值的测定 Numbers of total aerobic mesophilic bacteria, total enterobacteria, 总人数中温好氧菌，总肠杆菌， moulds and yeasts were determined on heated milk by 霉菌和酵母菌进行加热的牛奶 plating on Plate Count Agar, Violet Red Bile Glucose Agar, and Malt 电镀在平板计数琼脂，紫红胆盐葡萄糖琼脂，和麦芽 Agar medium, respectively. All media were purchased from Oxoid 琼脂培养基，分别。所有的媒体购买来自奶牛 (Oxoid Ltd, Basingstoke, Hampshire, UK). Plates of Plate Count Agar （蛋白有限公司，贝辛斯托克，汉普郡，英国）。平板计数琼脂平板 and Malt Agar were incubated at 30 C for 7北京世博翻译公司2 h, whereas plates of 麦芽琼脂培养在 30 摄氏为 7北京世博翻译公司2 小时，而板 Violet Red Bile Glucose Agar were incubated at 37 C for 48 h. 紫红胆盐葡萄糖琼脂培养在 37 摄氏 48 小时 The number of lactic acid bacteria was estimated at the end of 乳酸菌的数量估计在结束 milk fermentation, and after 45 days of storage at 4 C, by plating 牛奶发酵，经过 45 天的存储在 4 摄氏，电镀 on MRS (for lactobacilli) and M17 (for streptococci) agar media 夫人（乳杆菌）和多（链球菌）琼脂培养基 (Oxoid Ltd, Basingstoke, Hampshire, UK). In case of FMs produced （蛋白有限公司，贝辛斯托克，汉普郡，英国）。在柔性制造系统生产情况 with both thermophilic and mesophilic lactobacilli (e.g. FM1), MRS 与高温和中温乳酸菌（如 FM 1），夫人 plates were incubated for 48 h at 45 C or at 30 C, in order to 板培养 48 小时，45℃或 30℃，为 evaluate counts of thermophilic and mesophilic lactobacilli, 评价和中温嗜热乳酸杆菌计数， respectively. In case of FM北京世博翻译公司2, that contained, besides S. thermophilus, 分别为。在案件 fm北京世博翻译公司2，包含，除了嗜热链球菌， two mesophilic lactobacilli (L. casei and L. plantarum), colonies 北京世博翻译公司2 嗜温乳酸菌（L .干酪乳杆菌和植物乳杆菌），殖民地 picked up from MRS plates incubated at 30 C for 48 h were subjected 拾起太太板孵育 30 丙 48 小时受到 to DNA extraction. In details, a single colony was suspended 去氧核糖核酸的提取。在细节，一个单一的殖民地被暂停 in 北京世博翻译公司20 mL of microLYSIS buffer (Labogen, Terrazzano di Rho, Italy) and 在 北京世博翻译公司20 毫升的 microlysis 缓冲（labogen，terrazzano 迪卢，意大利）， subjected to a heating–cooling treatment (5 min at 65 C, 北京世博翻译公司2 min at 受到加热–冷却（5 分钟，65，北京世博翻译公司2 分钟 96 C, 4 min at 65 C, 1 min at 96 C, 1 min at 65 C, and 30 s at 96，4 分钟在 65，1 分钟在 96，1 分钟在 65 丙，和 30 时 96 C) using a thermal cycler (GeneAmp PCR System 9700: PE 96 丙）使用热循环仪（geneamp 聚合酶链反应系统 9700：体育 Applied Biosystems, Norwalk, CT), as indicated by the manufacturer. 美国应用生物系统公司，诺沃克，康涅狄格州），如制造商。 Subsequently, the DNA region codifying for rRNA 16S was 随后的基因区域，基因研究是编纂 amplified through polymerase chain reaction (PCR), using the 扩增通过聚合酶链反应（聚合酶链反应），使用 primer pair LpigF/LpigR (De Angelis et al., 北京世博翻译公司2006), in order to allot 引物对 lpigf/lpigr（少校等人。，北京世博翻译公司2006），以便分配 each single colony to a certain species. PCR and subsequent gel 每一个单菌落进行某些物种。聚合酶链反应和随后的凝胶 electrophoresis conditions, sequences determination and comparison 电泳条件，序列测定与比较 in disposable databases were as described by de Candia et al. 一次性使用的数据库进行描述的克里特岛等。 (北京世博翻译公司2007). （北京世博翻译公司2007）。 The values of pH at the beginning, at the end of fermentation, 值的值在一开始，结束时发酵， and after 45 days of storage at 4 C were determined by using 经过 45 天的存储在 4 摄氏测定 a Foodtrode pH electrode (Hamilton Bonaduz AG, Switzerland). 一个 foodtrode 电极（汉密尔顿博纳图斯股份公司，瑞士）。 北京世博翻译公司2.4. Determination of carbohydrates and 北京世博翻译公司2.4。测定碳水化合物和 fermentation end-products 发酵终产物 Lactose, galactose, glucose, D- and L-lactic acid were determined 乳糖，半乳糖，葡萄糖，-和 L -乳酸测定 by enzymatic methods, using the Megazyme (Megazyme International 酶解方法，使用 megazyme（megazyme 国际 Ireland Ltd., Bray, Ireland) kits K-LACGAR (lactose and 爱尔兰公司，布雷，爱尔兰）包 k-lacgar（乳糖， galactose), D-Glucose HK (glucose), and K-DLATE (D- and L-lactic 半乳糖），葡萄糖（葡萄糖），香港和 k-dlate（四-、L acid). Acetaldehyde was determined by an enzymatic method (Kit. 酸）。乙醛测定酶法（试剂盒。 Art. No. WCP647 CL-10 Plus, Diffchamb Italy S.r.l.. San Giuliano 艺术。第 wcp647cl-10 加，diffchamb 意大利公司。圣格里诺 Milanese, Italy). 米兰，意大利）。 北京世博翻译公司2.5. Determination of ACE-inhibitory activity 北京世博翻译公司2.5。测定 ACE 抑制活性 The pH 4.6-soluble fractions of FMs, obtained through centrifugation 值 4.6-soluble 分数，通过离心 (10,000 g, 10 min, 4 C), were assayed for ACE-inhibitory （10000 克，10 分钟，4 丙），检测 ACE 抑制 activity by the method reported by Nakamura et al. (1995) with 活动的方法报告的中村等人。（1995）与 some modifications. One hundred mL of a 5 mM solution of hippuryl一些修改。一百毫升的 5 毫米解决 hippuryl— L-histidil-L-leucine in 0.1 M sodium borate buffer containing l-histidil-l-leucine 在 0.1 米的硼酸钠缓冲液含有 0.3 M NaCl was mixed with 30 mL of pH 4.6-soluble fraction, or 0.3 米氯化钠混合 30 毫升的 PH 值 4.6-soluble 分数，或 water, and 北京世博翻译公司20 mL of ACE (100 mU mL 1) from rabbit lung; the 水，和 北京世博翻译公司20 毫升的王牌（100 亩毫升兔肺的 1）； mixture was incubated for 60 min at 37 C and the reaction was 混合培养 60 分钟在 37 和反应 stopped with 1北京世博翻译公司25 mL of HCl 1N. Controls without ACE added were 停止与 1北京世博翻译公司25 毫升的盐酸和不加控制的王牌。 included for each measurement. The hippuric acid liberated by ACE 包括为每个测量。马尿酸解放的王牌 自动检测语言 自动检测语言中 → 英英 → 中中 → 日日 → 中翻译结果 翻译结果（英 > 中）复制结果 翻译结果 查看 双语对照 was extracted with 0.85 mL of pure ethyl acetate and, after removal 提取 0.85 毫升纯乙酸乙酯，去除后 of ethyl acetate by vacuum evaporation, dissolved in 北京世博翻译公司2 mL of 乙酸乙酯的真空蒸发，溶解在 北京世博翻译公司2 毫升 distilled water and determined spectrophotometrically at 北京世博翻译公司2北京世博翻译公司28 nm. 蒸馏水和确定分光在 北京世博翻译公司2北京世博翻译公司28 纳米。 The percentage of ACE-inhibitory activitywas calculated as follows: ACEIactivitywas 百分比计算如下： (B A)/(B C) 100, where A ? absorbance in the presence of （二一）/（二丙）100，在?吸光度的存在 both ACE and pH 4.6-soluble fraction, B ? absorbance without pH 血管紧张素转换酶和 4.6-soluble 分数，乙?吸光度值无 4.6-soluble fraction, and C ? absorbance without ACE. 4.6-soluble 分数，和?吸光度无王牌。 北京世博翻译公司2.6. Determination of free amino acids and g-aminobutyric acid 北京世博翻译公司2.6。测定游离氨基酸和 g -氨基丁酸 Total and individual free amino acids (FAAs) and g-aminobutyric 和个人总游离氨基酸（原子吸收光谱法）和 g-aminobutyric acid contained in the pH 4.6-soluble nitrogen fractions of FMs were 含酸 PH 值 4.6-soluble 氮组分的柔性制造系统 analyzed by a Biochrom 30 series Amino Acid Analyser (Biochrom 分析了 biochrom30 系列氨基酸分析仪（biochrom Ltd., Cambridge Science Park, UK) with a sodium-cation-exchange 有限公司，剑桥科学园区，英国）与 sodium-cation-exchange column (北京世博翻译公司20 by 0.46 cm inner diameter). A mixture of amino acids at 柱（北京世博翻译公司20 的内径 0.46 厘米）。混合氨基酸 known concentration (Sigma Chemical Co., Milan, Italy) was added 已知浓度（西格玛化工有限公司，米兰，意大利）被添加 with cysteic acid, methionine sulphoxide, methionine sulphone, 与半胱氨酸，蛋氨酸亚砜，蛋氨酸砜， tryptophan, ornithine, taurine, hydroxy-proline and g-aminobutyric 色氨酸，牛磺酸，鸟氨酸，羟脯氨酸和 g-aminobutyric acid (GABA), and used as standard. Proteins and peptides in 酸（γ-氨基丁酸），和使用的标准。蛋白质和多肽 the samples were precipitated by addition of 5% (v/v) cold solid 对样品进行了沉淀除 5%（体积比）冷固 sulphosalicylic acid, holding at 4 C for 1 h and centrifuging at 磺基水杨酸，保持在 4 摄氏和离心在 1 小时 15,000 g for 15 min. The supernatant was filtered through 翻译公司 (责任编辑：北京翻译公司) |